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科技创新进展:植物基因组编辑范围获大幅度拓展

来源:中国水稻研究所作者:重点实验室发布时间:2016-03-21

近期,我所水稻染色体工程及基因组编辑创新团队通过对Cas9蛋白进行定点修饰,成功将水稻基因组内可编辑范围拓展到现有的2倍以上。

近年来,CRISPR-Cas9系统以其简便、高效的技术特点,迅速成为植物中最为广泛使用的基因组编辑手段,为种质资源创制以及基因功能研究等工作提供了极大的便利。CRISPR-Cas9系统在基因组上的精准切割需要特异识别一段称作为PAM的邻近核苷酸序列。目前植物中最为广泛使用的SpCas9能够识别的PAM序列局限为经典的NGG,这严重限制了Cas9的可编辑范围。为突破这个限制,科学家们在动物及微生物中进行了不懈的尝试并获得了一定的进展,然而在植物中尚未有成功的案例报道。

该创新团队通过定点突变的方法对水稻中广泛使用的SpCas9蛋白进行了改造,获得了两种Cas9 变体(VQR,VRER)。通过一系列的转基因实验证明,两种Cas9变体在水稻中分别可以识别NGA以及NGCG两个PAM序列。生物信息学分析表明Cas9变体的创制将使得CRISPR/Cas9系统在水稻中可编辑范围拓展到现有的2倍以上。此外,两种变体也可以同时对多基因进行有效的编辑,表明其与野生型Cas9一样具备巨大的应用潜力。因此,该工作为在水稻中进行更广泛的基因组编辑提供了新的可选工具。

相关研究成果于3月17日在线发表在国际知名学术刊物《Molecular Plant》上。我所二年级硕士生胡熙璕、王春助理研究员和付亚萍副研究员为共同第一作者,王克剑研究员为通讯作者。该研究得到国家自然科学基金、浙江省自然科学基金以及中国农科院科技创新工程经费资助。

相关链接: http://www.cell.com/molecular-plant/fulltext/S1674-2052(16)00069-1


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