科技创新进展: 揭示了昆虫杆状病毒DNA聚合酶N末端的多个功能位点
近日,病毒学领域的国际权威期刊《Journal of Virology》在线发表了我所微生物资源与生物农药创新团队完成的研究论文“The N terminus of Autographa californica Multiple Nucleopolyhedrovirus DNA Polymerase is Required for Efficient Viral DNA Replication and Virus and Occlusion Body Production”,该研究揭示了昆虫杆状病毒DNA聚合酶N末端的多个功能位点。
杆状病毒(Baculovirus)是一类特异感染节肢动物的病原微生物,目前被广泛应用于生物农药、蛋白质表达以及基因治疗。DNA复制是病毒生命周期中最重要的一环,也是病毒增殖周期中最重要的事件。昆虫杆状病毒DNA聚合酶是病毒基因组复制所必需的关键酶,其N末端结构域高度保守,然而有关病毒DNA聚合酶N末端序列的功能研究一直未见报道。
研究人员对N末端的连续截断发现,随着N末端序列的逐渐减少,构建的重组病毒在病毒的扩散、基因组的复制以及多角体形成等方面的能力也相应地下降。对DNA聚合酶N末端生物信息学分析显示,虽然前64个氨基酸同源性不高,但存在一个保守的α-β-β-β二级结构,以及分布于氨基酸 67-186区域的四个保守模序,对这些保守模序的位点突变能够影响病毒的复制以及病毒的产量,点突变使DNA聚合酶蛋白半衰期减短、活性变弱,从而影响了病毒DNA的复制,最终导致病毒产量以及多角体合成的下降。该研究对杆状病毒在昆虫体内扩散提供了重要的理论依据,具有潜在的应用价值。
该研究得到国家自然科学基金、浙江省自然科学基金以及中国农科院科技创新工程资助。陈国庆博士为论文的第一作者,吴丽娟博士、研究生李佩等人参与了此项研究,冯国忠研究员为论文的通讯作者。
原文链接:http://jvi.asm.org/content/early/2018/03/15/JVI.00398-18.abstract
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